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菊花的组培快速繁殖

文章作者:zhuobo 发布时间:2020-12-08 10:53:27 浏览次数:0

  外植体的选取、灭菌和接种

  用于快繁的外植体很多,如茎段、侧芽、叶、花序梗、花序轴、花蕾等,下面以茎尖和茎段、花序轴、花蕾为外植体说明。

  A)选取无病虫害、粗壮的茎尖和茎段,要求叶密茎粗,以利于将来分化迅速,无性系后代质量好。选茎尖时嫩叶不要去掉太多,以免伤口面过多,过多的叶可在灭菌后、接种之前除去。选茎段时先除去叶,留一段叶柄,灭菌水洗后,将茎段面及叶柄再切出新茬。接种时注意极性,尤其是茎尖不可倒置或侧植。

  B)花序轴应选取具该品种典型特征的、饱满充实的蕾,很好要开放而未开放的花蕾,这时花瓣外有一层薄膜包围,里面洁净无菌,采后便于表面灭菌。过于幼嫩的花蕾,不便灭菌和剥离。

  C)取花蕾时在取材前2-3周,很好把母株置于温室内培养,不浇水,在接种前选择直径4~6毫米的花蕾剪下,常规消毒。将已经灭菌的花蕾纵切成大致相等的4~6小块,然后接种到芽诱导培养上,MS+BA0.1,经过10~15天的培养,外植体就会形成愈伤组织。再经过20~30天的培养,愈伤组织分化出较多的丛生芽,这时就可将其分割成数块继代培养,配方同诱导培养基。

  培养基及培养条件

  适用于菊花的培养基种类很多,如MS、B5、N5、white等等。但大多采用MS培养基,添加6-BA 2~3mg/l,NAA 0.02~0.2mg/l。菊花对激素的要求并不是很严格的,适用的范围很广。菊花试管培养的温度范围较宽,22~28℃都可以,以24~26℃很好。培养室光照时每天12~16小时为宜,光强1000~4000lx较好。

  继代培养

  外植体经培养后,一般经4~6周,茎尖直接分化出新芽,或经愈伤组织分化出新芽;茎段、花序轴侧芽萌发,可产生1~ 数个芽。最初分化率及分化数量都较少,但随继代次数增加。增殖方式除诱导丛生芽增殖外,也可用茎切段作微型扦插繁殖。丛芽增殖时,将芽丛切或小块,转到分化培养基中即可。微型扦插则以嫩茎梢作材料,将嫩梢剪成1节带1叶的茎段。然后将切段基部插入MS0或MS+NAA0.1的培养基中培养,4~5周后,腋芽即生长成小植株,再照上述方法切剪茎段,重复培养。


  生根和移栽

  菊花无根苗生根一般较容易,通常在增殖培养上久不转瓶,即可生根,但这种根的根毛较少或无,不利将来移栽和生长,所以常用下列方法处理:

  一是无根苗的试管生根 切取3cm左右无根嫩茎,转插到1/2MS+NAA(或IBA)0.1的培养基中,经两周即可生根。然后再进行移栽驯化,移栽初期保持高湿度条件,营养钵基质浇透水,取出生根的试管苗,洗掉附着在根部的培养基,用竹签在基质上打一小孔,将幼苗插入基质中。然后加设小拱棚以保湿,随着幼苗的生长,逐渐降低空气湿度和基质含水量,转为正常苗的管理阶段。

  二是无根嫩茎直接插植到基质中生根。利用菊花嫩茎易于生根的特点,可免去试管生根一道之序。剪取2~3cm无根苗,插植到珍珠岩或蛭石的基质中,基质事先用生根激素溶液浸透,10天后生根率可达95~100%。

  菊花用组织培养快速繁殖,一般4~6周为一个周期,增殖倍率均在5~10倍以上。若以5倍计算,平均以40天为一个周期,一年可获得100~900万株苗,比常规繁殖快数千倍。


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