组培室设计基本规则

组培工厂应选址在安静、洁净、可避开各种污染环境的地方，才能减少操作污染，降低生产成本，确保工作的顺利进行。根据已确定的生产规模，设计组培生产车间时，要全面了解工作中需要哪些基本的设备条件，以便因地制宜利用现有房屋改建或新建组培工厂，尽量做到合理布局。通常按组培生产程序先后，顺次安排成一条连续的生产线，主要包括培养器皿清洗;培养基的配置、分装、包扎和高压灭菌;无菌操作材料的表面灭菌和接种;进入培养室培养;试管苗的种植和前期管理等。较为理想的平面布置见文章后面的图3-1，3-2。

  一、清洗室

  要求具有耐酸碱的水池和排水口。每天都有大量的植物材料碎片、琼脂等东西堆积，因此排水口一定要安装过滤网，做到每天清洗检查，一是减少微生物滋生源，二是避免排水系统堵塞，带来不必要的麻烦。

  配有不同形状及大小的洗涤刷，如果有可能安装洗瓶机器，更能提高工作效率。 配备数个塑料箱盛装瓶子，将瓶放入箱内时，应倒立，这样可使瓶子自然干燥。

  二、培养基配制及灭菌室

  手提式高压灭菌锅2～3个，用于一些小型物品或急需用品的高压灭菌。

  组培工厂必须配备1至数台大型灭菌锅，直径40～50cm的不锈钢或铝锅2～3个，用于溶解琼脂或调制培养基，加热源好采用煤气灶或用电。

  去离子水发生器1～2台。

  干燥箱1台，用于器皿或急需用具的干热灭菌。

  大型工作台1～2张，用于培养基分装、包扎等。

  玻璃柜1个，用于放置药品等。

  试剂瓶、具刻度移液管、皮下注射器、量筒、搪瓷量杯、容量瓶、各式塑料瓶或塑料桶等易损品数个，更重要的是配备大量充足的培养瓶。

  三、检测及称量室

  PCR仪：可用于真菌和细菌性病原菌的检测和部分病毒病的检测。

  酶标仪：通过血清免疫技术(ELISA)进行主要病毒病的检测。

  双目显微镜、解剖镜：用于植物组织培养材料的形态发育及细胞观察。

  凹穴载玻片：用于细胞悬浮培养。

  载玻片和盖玻片：用于制作细胞和组织的显微制片。

  光照培养箱;用于不同种类植物培养方法或培养条件的研究。

  冰箱：用于贮存化学药品，培养基母液和植物材料等。

  低温冰箱：用于长期贮存培养基储备液，某些酶和椰子汁等。

  称量仪器：包括感量为1/10000的电子天平，感量为1/10的普通托盘天平，称量为1～5kg的台秤等，用于药品的称量配制和植物组织生长量的测定。

  水质及培养基检测仪器：包括pH酸度计、电导率仪或Ec值测定仪。

  细菌滤膜及其支座：用于对溶液进行过滤灭菌。

  四、无菌操作室(接种室)

  这是组培工厂的核心和关键部分，是进行无菌操作的场所，如植物材料的消毒接种，无菌材料的继代，丛生苗的增殖或切割，嫩茎插植生根等。它也关系到污染率这项重要的成本指标的高低，直接影响组培工厂的工作效率及经济效益。无菌操作室原则上宜小不宜大，要有缓冲间，以便进人无菌室前在此洗手、换衣、换鞋、预处理材料等。无菌室的地板和四周墙壁应尽可能光洁，不易积染灰尘，易于采取各种清洁和消毒措施。无菌室内要吊装紫外灭菌灯，用于经常照射灭菌。要安装空调机，保持室温在23～25℃，原则上无菌室的门窗应紧闭，保持与外界相对隔绝。无菌操作室内需要的用具如下。

  超净工作台：用于进行无菌操作。

  室内小推车：用于运送培养物、培养基和各种器皿用具。

  酒精灯：用于灼烧各种金属用具。

  手持喷雾器：用于在超净工作台内或对其他物品喷洒酒精进行消毒。

  带盖螺口玻璃瓶：用于盛装无菌水，对植物材料进行表面消毒。

  大的钝头镊子：用于进行接种和继代、生根等操作。

  细解剖针;用于植物材料的解剖。

  解剖刀：用于切割植物材料。

  各种孔径的不锈钢筛网：用于分离太小不同的细胞团。

  低速台式离心机：用于沉淀细胞，以便确定沉积细胞的总体积或清洗原生质体。

  振荡培养器;用于植物材料的液体培养。

  血球计算器;用于细胞计数。