黑枸杞组培育苗技术的研究

黑枸杞属茄科枸杞属，是一种具有重要药用保健价值的棘刺灌木，野生资源多散布于柴达木盆地的格尔木、德令哈、都兰等地区的戈壁滩上。黑枸杞的浆果具有良好的药用价值和保健价值，经测定，黑枸杞果实中的总糖含量为6.9%，总酸含量为0.74%。此外黑枸杞中还检测出了人体所必须的17种氨基酸，以及丰富的微量元素。据中医文献报道，黑枸杞味甘、性平，具有抗衰老、清心热，改善睡眠、美容养颜等众多作用。随着人们对其保健价值研究的深入，近年来黑枸杞越来越受到广大消费者的青睐，栽培面积也迅速扩大。为了尽快培育出大量遗传性状完全一致的黑枸杞优良种苗，我们研究了黑枸杞组培育苗技术，研究结果介绍如下：

1 材料与方法

1.1 试验材料

6月份，取黑枸杞当年萌发的新枝腋芽为外植体。

1.2 外植体消毒

剪取生长健壮的1年生黑枸杞枝条，在室内除去叶片后剪成约8 cm长的茎段，用洗涤灵水轻轻洗刷表面，注意不要破坏腋芽，洗刷完成后置于流动水下冲洗干净，然后在无菌条件下进行以下操作：(1)用75%酒精浸泡30s，用无菌水冲洗2遍;(2)用0.1%升汞溶液浸泡8min，用无菌水冲洗3遍后备用。

1.3 培养条件

外植体的腋芽诱导、增殖培养和生根培养都在培养室内进行，室内温度白天控制在25±2℃，夜间温度为23±2℃，光照时间为16 h/d，光强2000～2500 lx。诱导培养、增殖培养阶段以MS为基本培养基，加入35.0g/L蔗糖、8.0g/L琼脂、pH值为5.6～5.8。生根培养阶段以1/2MS为基本培养基，其他条件不变。

1.4 诱导培养试验

以MS为基本培养基，添加不同质量浓度的激素(BA、IBA及NAA)配制12个配方的诱导培养基(表1)。在无菌环境中将消毒后的外植体切取腋芽，接种于诱导培养基上，每个配方接种50瓶，每瓶1个外植体，20d后统计其萌芽率，40d后统计腋芽生长高度。

表1 诱导培养基不同激素浓度配比表 mg·L-1

1.5 增殖培养试验

待腋芽长到1.0cm以上时，将其从基部剪开，剪成1.0～2.0cm的单株小芽，转接到以MS为基本培养基，添加不同质量浓度的激素(BA、IBA)配制的9个配方的增殖培养基上(表2)。每个组合接种50瓶，每瓶1个嫩芽，40d后统计其增殖率。

表2 增殖培养基不同激素浓度配比表 mg·L-1

1.6 生根培养试验

剪取3 cm以上的健壮增殖芽，接种到以1/2 MS为基本培养基，添加不同质量浓度的激素(NAA、IBA)配制的4个配方的生根培养基上(表3)进行生根培养。每个处理接种10瓶，每瓶接种5株试管苗。接种30d后统计生根率及根长。

表3 生根培养基不同激素浓度配比表 mg·L-1

2 结果与分析

2.1 诱导培养基的选择

表4 不同诱导培养基组合对黑枸杞腋芽诱导的影响

2.3 生根培养基的选择

黑枸杞组培苗接入生根培养基约15d后芽基部开始有白色根长出，30d后统计生根率。每株组培苗的所有根总长超过2.0cm，即为合格生根苗。理想的生根苗应有超过3条根，每条根长度在1.0cm以上，3.0cm以下，过长则移栽过程中易断裂，进而影响移栽成活率。从下表6可以看出，两种激素配合使用具有协同作用，不但生根率高，而且单株组培苗的生根数量也多。因此黑枸杞适生根培养基配方为1/2MS+NAA 0.2mg/L +IBA 0.6mg/L。

表6 不同生长素配比对黑枸杞组培苗生根的影响

3 结论

以黑枸杞当年生枝条腋芽为外植体，研究了外植体诱导、增殖及生根阶段的佳培养条件。通过研究，找出了黑枸杞组培育苗各个过程的佳培养基配方，使黑枸杞组培苗外植体的诱导率达到了78%，有效芽增殖倍数可达到6.32倍，生根率达到92%以上。形成了较为完备的组培工厂化育苗技术，为黑枸杞良种苗木的大规模工厂化生产奠定了技术基础。